干細胞是目前醫學(xué)界非常重要的研究領(lǐng)域,干細胞技術(shù)被廣泛應用于再生醫學(xué)、基因治療以及細胞治療等方面。干細胞無(wú)血清培養基是干細胞培養過(guò)程中使用的一種特殊培養基,相對于傳統含有血清成分的培養基,它不會(huì )帶來(lái)血清帶來(lái)的易感染,污染,批次差異等問(wèn)題,大大地提高了干細胞培養的效率和穩定性。那么接下來(lái)就讓我們了解一下
干細胞無(wú)血清培養基的使用方法。
使用步驟:
1、準備:拉取需要使用的培養基,放置于潔凈的操作臺上,旋轉均勻。
2、取樣:將需細胞溶解后且雜質(zhì)過(guò)濾完畢的細胞懸浮液,加入到培養基中,按照比例加入適量的細胞因子,并從側面充分旋轉混合均勻。
3、孵育:將混合好的培養基,加入到預先處理過(guò)的培養皿中,貼壁培養或懸浮培養,放入孵箱中,保持恒溫濕度環(huán)境。
4、觀(guān)察:觀(guān)察各培養皿內的細胞生長(cháng)情況,代換培養基時(shí)需要小心、輕柔地抽取并加入新的干細胞無(wú)血清培養基。
使用注意事項:
1、不要將未經(jīng)處理的培養基放在較高溫度下,其儲存的環(huán)境應為2-8℃之間,且避免陽(yáng)光直射和暴露于外界空氣中。
2、混合培養基時(shí),須使用專(zhuān)門(mén)的勻漿裝置或渦流混合器,以避免不均勻性的出現。
3、必須防止雜質(zhì)污染整個(gè)細胞培養過(guò)程,并采用專(zhuān)門(mén)定制的頸口瓶、平底瓶等工具。
4、細胞溶解后的懸浮液在加入培養基前,必須先進(jìn)行微孔濾器過(guò)濾,以避免細胞碎片或雜質(zhì)進(jìn)入干細胞中,影響從初級培養中篩選出良好的細胞系的篩選效率。
總之,干細胞無(wú)血清培養基的使用對干細胞方面有著(zhù)重要的意義,正確的使用方法和注意事項能夠為生物技術(shù)的長(cháng)足進(jìn)展提供保障。