對于cck8試劑的使用相比于多用戶(hù)都充滿(mǎn)了疑惑，在實(shí)驗的過(guò)程中也經(jīng)常會(huì )遇到一些難題，寸步難行，今天呢小編就總結下實(shí)驗中客戶(hù)常見(jiàn)問(wèn)題相關(guān)疑問(wèn)解答供大家參考下吧

1.cck8試劑與胸苷結合檢測之間是否有相關(guān)性？

有。然而，請注意由于cck8試劑使用的檢測原理與胸苷檢測的不同，因此結果可能不同。

2.cck8試劑能否檢測細菌細胞？

可以檢測E.coli，但不能檢測酵母細胞。向100 μl E.coli培養液中加入10 μl cck8試劑溶液，并培養1-4個(gè)小時(shí)或guo夜。

3.cck8試劑穩定嗎？

cck8試劑在0-5℃下能夠保存至少6個(gè)月，在-20℃下避光可以保存1年。如果需要長(cháng)期保存，我們推薦-20℃的儲藏條件。

4.如果沒(méi)有450 nm的濾光片，還可以使用哪些其他濾光片？

還可使用450 nm到490 nm之間的濾光片。

5.如何減少由于cck8試劑在槍頭上或孔壁上的殘留所帶來(lái)的誤差？

可以在加樣前用培養基稀釋cck8試劑并混勻后加樣。

6.cck8試劑是什么顏色？

應該是粉紅色。若顏色不一樣，有可能會(huì )影響測定。

7.CCK8能否對活細胞進(jìn)行染色？

不能。因為CCK8的主要成分是一種水溶性的四唑鹽 (WST8)，并通過(guò)電子載體1Methoxy PMS將活細胞中的電子交換到培養基中的WST8上。由于生成的甲ā也是高度水溶性的，因此CCK8不能對細胞進(jìn)行染色。

8.CCK8檢測溶液對細胞是否有毒？

CCK8溶液自身因為高濃度的1Methoxy PMS的存在而具有一點(diǎn)毒性。但是，加到培養基中的CCK8是沒(méi)有毒性的，因為被稀釋了10倍。因此，長(cháng)時(shí)間的培養，如隔夜或者培養數天是可以的。同一個(gè)細胞培養液在CCK8檢測后還可以用于其他細胞增殖檢測，如結晶紫檢測，中性紅檢測或者DNA熒光檢測等。由于每種細胞對于CCK8的耐受力都不同，因此在需要進(jìn)行長(cháng)時(shí)間培養時(shí)，先檢測一下細胞在加入CCK8培養后的活力。

9.在做加藥實(shí)驗時(shí)，藥物對測定是否有影響？如何解決？

有時(shí)會(huì )有影響。如果藥物具有還原性，會(huì )和CCK8發(fā)生顯色反應，增加吸光度。解決辦法：首先要確認藥物是否有吸收，在含有藥物的培養基中加入CCK8，測定450 nm的吸光度，如果它的吸光度比不含藥物的培養基 (加CCK8)的吸光度高，則證明藥物有影響，可在加CCK8之前更換培養基，去掉藥物的影響。

10.每次測定的數值不一樣，是什么原因？如何解決？

可能會(huì )有以下幾個(gè)原因： 1. 當在培養箱內培養時(shí)，培養板zui外一圈的孔zui容易干燥揮發(fā)，由于體積不準確而增加誤差。 一般情況下，zui外一圈的孔只加培養基，不作為測定孔用。 2. 有可能會(huì )因為CCK8沾在壁上而產(chǎn)生誤差，建議在加入CCK8后，輕輕敲擊培養板以幫助混勻。 3. 每孔的細胞數量過(guò)多或過(guò)少。請預先在1,000100,000個(gè)/孔范圍內摸索條件。

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